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使用生物净化的方法可以保存优良实验动物品种

作者:超净工作台 日期:2014-04-30 15:07:13 信息来源:www.chaojinggongzuotai.com

  目前剖腹产代乳技术是建立清洁级动物群体或SPF 动物群体的唯一经济有效的方法,但是剖腹产净化技术给远交类型群体带来了/ 瓶颈效应0,数目过少会给基因带来随机的丢失[7] 。封闭群动物的净化不同于近交系动物,要求能够尽可能的保持现有的基因库,使净化前后生物学特性保持一致。因此,选择待净化小鼠时须保证他们来自不同的父母,且待剖的母鼠不能少于150 只。
  
  实施子宫摘除术净化小鼠实验时,应注意净化鼠与代哺乳鼠的产仔时间。我们净化的是湖北的封闭群KM 小鼠,而用做代哺乳鼠是来自北京的SPF级KM 小鼠。由于不清楚来自两个地区的KM 小鼠是否可以同步产仔,我们采用SPF 级比普通级早2d、两种小鼠同时配种、SPF 级比普通级晚2 d 的方法进行研究。从3 批手术结果来看,第三批,代乳鼠比待净化鼠早2 d 配种,配种50 对,成功32 例,育成小鼠253 只,成活率64% 。效果最好; 第一批即两种小鼠同时配种,成功18 例,育成小鼠150 只,成活率36%,效果次之; 第二批SPF 级比普通级晚2 d 配种,仅成功7 例,育成小鼠57 只,成活率为14%,效果最差。
  
  我们认为: KM 小鼠的配种时间应该是哺乳鼠早于待剖鼠,因为产仔3~ 4 d 内,母鼠对仔鼠的识别能力并不强,提早将代哺乳鼠准备好,待净化的仔鼠一旦被剖出来就有母鼠哺乳。第二批的效果不理想,就是因为当时普通级动物已到了临产期,而SPF级鼠中没有现成的代哺乳鼠。另外基于KM 小鼠产仔数较多,代哺乳鼠应该是待净化鼠的2 倍,即剖得不满10 只仔鼠可由1 只代哺乳鼠带养,剖得10 只以上的可由2 只代哺乳鼠分别代养。本次我们将一次产10 只以上的仔鼠,只保留10 只,多余的弃去,本身就是一个损失。
  
  采取子宫摘除术进行生物净化小鼠时,由于漏诊和不可能持续不断进行手术,会有一些待净化的孕鼠自然生产。补救方法是将这些小鼠分批进行净化,对已生产的母鼠,在它的第2 或3 胎要认真观察避免漏诊。
  
  采用本文介绍的方法净化小鼠,应该特别注意无菌操作。超净工作台的处理应在使用前用紫外线灯照射约1 h,每做完1 例手术后,用消毒液擦固定板,紫外灯照射5~ 10 min; 传递窗在使用前开灯至少2 h,并在手术过程中持续用紫外灯照射( 第二术者在取离体子宫时除外) ; 传递窗内/ 灭菌渡槽0,在术前换掉平时放置的消毒水,换上新鲜用灭菌水配制成37 e 的2%的过氧乙酸溶液; 手术结束后,从手术区到繁殖区用消毒液擦拭、喷雾、拖地,以防污染。

 

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